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精子分析中基于CASA技術(shù)的應(yīng)用指南（一）
原著：ESHRE Andrology Special Interest Group*
一、簡介
本文中包含的建議代表了參加1997年4月3日至6日在意大利的圣米尼亞托舉行的CASA專題討論會中35名代表的一致意見。在專題討論會上提出了數(shù)字圖像分析靜態(tài)和運動精子的理論和原則，并討論了現(xiàn)在和未來CASA技術(shù)的實際應(yīng)用在研究和臨床中的位置。
我們強烈呼吁CASA的用戶和設(shè)備制造商要同樣仔細考慮本文推薦的方法，CASA未來的發(fā)展需要各方共同合作。
需要指出的是：所有參加專題討論會的成員都一致同意CASA制造商必須給CASA用戶提供更加全面的培訓(xùn)和支持計劃。盡管在下面推薦的方法中已經(jīng)包含這一點，但我們?nèi)匀灰獜娬{(diào)： CASA在臨床應(yīng)用取得更加深遠的進步之前，CASA技術(shù)原理和CASA儀器使用方法的提高培訓(xùn)是必不可少的。
在以前的ESHRE男科學(xué)專門興趣小組開展的專題討論會中就包含了本文中幾種逐字重復(fù)的推薦方法。
二、對所有哺乳動物的普遍推薦方法
1、用戶必須認識到：對CASA而言標(biāo)準(zhǔn)化和內(nèi)外部控制是最重要也是最基本的要求，就像它們在其他男科實驗室診斷程序中的作用一樣。
2、設(shè)備制造商被要求提供針對用戶日常使用CASA設(shè)備更加廣泛的培訓(xùn)，而不僅僅是簡單的安裝和設(shè)置指令。這種培訓(xùn)應(yīng)該包括處理標(biāo)本的具體建議和分析的準(zhǔn)備工作。我們建議CASA制造商應(yīng)該考慮提供那樣的培訓(xùn)課程，就像在國內(nèi)或國際會議中介紹衛(wèi)星一樣。
3、就像所有的測量系統(tǒng)一樣，用戶的責(zé)任是確保取樣取適當(dāng)數(shù)目的細胞。這樣做是為了CASA獲取的結(jié)果滿足在統(tǒng)計學(xué)上正確解釋的需求，包括敏感性和特異性。如果CASA的原始數(shù)據(jù)用于臨床決策中，這種方法必不可少。
4、就如先前提出的觀點，影響CASA儀器表現(xiàn)的基本因素是使用者的技術(shù)水平。這是強制性的要求，技術(shù)人員必須培訓(xùn)到理解CASA背后的理論和最初的參數(shù)設(shè)置對產(chǎn)生數(shù)據(jù)的影響。
5、質(zhì)量控制(QC)非常重要，每個使用CASA的實驗室必須有質(zhì)量控制的程序。在檢測精子濃度時建議：超過一定精子濃度范圍時，CASA結(jié)果應(yīng)和改良的Neubauer計數(shù)板人工檢測結(jié)果直接對比分析。在精子活力分析中，建議準(zhǔn)備錄像帶以備使用，或者CASA設(shè)備有運動回放功能選項也一樣，在使用正確設(shè)置參數(shù)情況下確保所有的運動精子被識別出來。最低要求是：當(dāng)儀器開啟使用和每次運行參數(shù)改變后，這些量控制程序應(yīng)保持運行。所有CASA系統(tǒng)應(yīng)配置常見的視頻輸入輸出程序允許質(zhì)量控制(QC)程序以50或60 Hz幀率的錄像。
6、在所有的手稿和報告中，在遵循CASA指南前提下，提出的方法應(yīng)建立在足夠具體的細節(jié)上。這些包括：圖像采集幀率、跟蹤采集圖像時間、采用的平滑算法、觀測精子數(shù)、計數(shù)板的深度、儀器的模型、軟件版本號、顯微鏡光學(xué)原理和放大倍數(shù)。
7、計數(shù)板深度必須足夠精子無束縛運動。這取決于計數(shù)板類型。此外計數(shù)板的深度必須匹配合適深度聚焦的光學(xué)條件。
8、在所有的CASA的分析中，用戶必須驗證視野中所有運動的精子全部被軟件捕獲跟蹤。